Point sur les variants

 

Le Monde.fr   Marc Gozlan

Au Brésil, l’épidémie de Covid-19 est aujourd’hui dominée par plusieurs lignées virales SARS-CoV-2 qui ont toutes en commun de posséder la mutation E484K dans la protéine S (spike ou spicule), qui permet au virus de se fixer sur les cellules qu’ils infectent. Cette mutation est problématique dans la mesure où elle peut contribuer à un échappement aux anticorps.

Parmi ces lignées virales brésiliennes, le variant P.1 est considéré comme préoccupant (Variant Of Concern ou VOC en anglais). Deux autres lignées, baptisées P.2 et N.9, sont considérées comme des variants à suivre, encore appelés variants d’intérêt (Variants Of Interest ou VOI en anglais).

Les variants VOC P.1 et P.2 ont évolué au Brésil à partir du même lignage (B.1.1.28) alors que le VOI N.9 dérive, lui, d’un autre lignage (B.1.1.33). Ce dernier est probablement apparu dans ce pays en août 2020 et s’est répandu dans différents états des régions Sud-Est, Sud, Nord et Nord-Est.

Le variant P.1 a été pour la première fois identifié au Japon chez des voyageurs en provenance d’Amazonas, état du nord du Brésil. Il s’est rapidement diffusé à travers tout le Brésil depuis son identification le 11 janvier 2021. Il a ensuite été établi qu’il était déjà présent dans des échantillons biologiques collectés début décembre 2020. Des analyses phylogénétiques ont montré qu’il avait probablement émergé au début ou à la fin de novembre 2020. À Manaus, capitale de l’état de l’Amazonas, la fréquence du variant P.1 a très rapidement atteint les 73 % en janvier 2021.

Emplacements des mutations K417N/T, E484K et N501Y au sein du RBD (en vert) de la protéine spike (S ou spicule) du SARS-CoV-2, région qui interagit avec le récepteur ACE2 présent à la surface des cellules cibles du virus. Ces mutations sont les plus problématiques du fait de leur potentiel à permettre au virus d’échapper à l’activité des anticorps neutralisants qui sont dirigés contre cette région.

Contrairement à la lignée dont il dérive, le variant P.1 renferme les mutations E484K et N501Y, également présentes dans le variant B.1.351 identifié en Afrique du Sud. Il comporte environ 35 mutations. L’une d’elles est la mutation K417N/T, située, comme E484K, dans une région cruciale dénommée RBD, qui est le domaine de liaison de la protéine spike au récepteur cellulaire ACE2.

Le variant P.1 renferme donc trois mutations préoccupantes dans le RBD de la protéine spike : K417N/T, E484K et N501Y.

Carte montrant les pays dans lesquels le variant P.1 a été isolé. Les pays ayant le plus déposé de séquences dans les bases de données génétiques sont représentés par des couleurs plus foncées. © cov-lineages.org.

Isolé dans trente-six pays

À ce jour, outre le Brésil et le Japon, le variant P.1 a été isolé dans 36 autres pays (par ordre décroissant du nombre de séquences génétiques rapportées) : Italie, États-Unis, Belgique, Pays-Bas, Allemagne, France, Royaume-Uni, Espagne, Suisse, Portugal, Irlande, Japon, Suède, Turquie, Mexique, Australie, Nouvelle-Zélande, Jordanie, Luxembourg, Norvège, Roumanie, Singapour, Costa Rica, Aruba (Antilles néerlandaises), Iles Féroé, Corée du Sud, Slovénie, Saint-Martin (Caraïbes). En Amérique du Sud, il a été isolé au Chili, au Pérou, en Colombie, au Paraguay, en Équateur, en Guyane française et au Suriname. La semaine du 6 avril 2021, en Guyane, le variant brésilien représentait 76 % des prélèvements criblés et/ou séquencés (le variant anglais était, lui, présent à hauteur de 11 %).

En France, des enquêtes « flash », faisant appel au séquençage du génome viral sur une sélection aléatoire de prélèvements RT-PCR positifs, sont régulièrement menées. Celle du 16 mars 2021 a montré une prévalence nationale du variant P.1 de 0,5 %.

Au niveau national, Santé publique France déclarait pour la semaine du 22 au 28 mars 2021 une suspicion cumulée de variant sud-africain ou brésilien de 4,4 % sur la base de résultats de tests PCR positifs de criblage.

Chez les 10-19 ans, la proportion de suspicions de variant sud-africain ou brésilien était de 3,8 %, de 4,5 % chez les 20-29 ans, de 3,9 % chez les 40-49 ans, de 4,3 % chez les 30-39 ans, de 3,9 % chez les 40-49 ans, de 4,1 % chez les 50-59 ans. Elle est de 4,4% chez les 60-69 ans et 70-79 ans et de 4,8 % chez les 80-89 ans. Chez les personnes âgées de 90 ans et plus, cette proportion est de 5,1 %.

Un variant plus contagieux

À ce jour, les études ont estimé que le variant P.1 est 1,4 à 2,2 fois plus contagieux que la souche de référence. Publiée le 23 mars 2021 sur le site medRxiv, une étude, réalisée par des épidémiologistes de l’université fédérale de Santo André (état de São Paulo), rapporte une transmissibilité de P.1 2,6 fois plus importante par rapport à la souche de référence [1].

Au Brésil, le variant P.1 serait donc un peu plus contagieux que le variant anglais B.1.1.7 qui, lui, présente une transmissibilité accrue d’un facteur 2,3 par rapport à la souche historique de référence.

Réinfections par le variant P.1

Les estimations de cette équipe brésilienne confirment par ailleurs que la capacité du variant P.1 à entraîner des réinfections, à savoir provoquer une nouvelle infection chez des individus ayant déjà été infectés par la souche ancestrale.

Selon les estimations des épidémiologistes brésiliens, les réinfections par P.1 représentaient 28 % de cas survenus à Manaus entre novembre 2020 et janvier 2021 [2].

Quid de la dangerosité du variant P.1 ?

Mais le variant P.1 est-il pour autant plus virulent que les lignées qui circulaient auparavant au Brésil ? À ce jour, les données cliniques manquent. On ignore si P.1 est associé à une charge virale plus élevée ou à une durée d’infection plus longue. En d’autres termes, la pathogénicité de P.1 est encore inconnue.

La presse brésilienne fait néanmoins état d’une augmentation de la mortalité chez des patients plus jeunes qu’auparavant. On peut cependant noter que l’on observait déjà, au début de la pandémie, plus de décès chez les patients de moins de 60 ans au Brésil par rapport à ce que l’on avait observé en Chine ou en Italie.

Afin d’en savoir plus, des épidémiologistes américains (Cincinnati, Ohio) et brésiliens (université fédérale de l’état du Parana, Curitiba) ont analysé les données sanitaires de cet état situé dans le sud du Brésil, frontalier avec l’Argentine au sud-ouest et le Paraguay à l’ouest. Publiée le 26 mars sur le site medRxiv, leur étude porte sur des informations collectées entre le 1er septembre 2020 et le 17 mars 2021. Dans l’état du Parana, le variant P.1 a été identifié pour la première fois le 16 février 2021. Depuis mars 2021, il a été isolé dans environ 70 % des échantillons biologiques collectés.

Les résultats préliminaires obtenus par Maria Helena Santos de Oliveira et ses collègues montrent que depuis la diffusion du variant P.1 on observe une augmentation du taux de létalité au Parana dans toutes les tranches d’âge, en particulier parmi les jeunes adultes et ceux d’âge moyen. Il n’a cependant pas été noté de risque accru de décès chez les enfants et les adolescents.

Plus précisément, le taux de létalité parmi les 20-29 ans a ainsi triplé entre janvier et février 2021, passant de 0,04 % à 0,13 % dans cette fourchette d’âge. Durant cette même période, il a doublé parmi les 40-49 ans, atteignant 0,9 % dans cette classe d’âge. De même, ce taux a quasiment doublé chez les 30-39 ans et les 50-59 ans. Une augmentation des décès a également été observée parmi les plus de 60 ans, mais pas dans les mêmes proportions.

Les raisons de l’augmentation du taux de létalité dans ces différents groupes d’âge ne sont pas claires. Cela tient-il à une plus forte exposition au virus parmi les adultes les plus jeunes ou à une virulence accrue du variant P.1 ? Il n’est pas possible aujourd’hui de conclure entre ces deux hypothèses. En effet, il semble difficile de distinguer entre ce qui tiendrait d’une augmentation de la virulence du SARS-CoV-2 et ce qui ne serait que la conséquence d’une pression extrêmement forte sur les hôpitaux, d’un manque de lits de soins critiques, d’un manque d’approvisionnement en oxygène, voire d’un effondrement local ou régional d’un fragile système de santé. Avec pour résultat une prise en charge médicale non satisfaisante et une mortalité plus importante.

Bien que l’on puisse penser que la transmissibilité accrue du nouveau variant P.1 a entraîné une saturation du système hospitalier et un dépassement des capacités de soins, force est de constater que l’augmentation de la létalité a pourtant coïncidé avec une baisse  du nombre total de cas d’infections dans l’état du Parana, font remarquer les chercheurs. Il est donc possible que les adultes jeunes, gagnés par la « fatigue pandémique », soient moins respectueux des gestes barrières et s’exposent donc plus au virus. Cette hypothèse est cependant loin d’être pleinement satisfaisante pour expliquer la soudaine augmentation de la létalité alors même que le nombre de cas diminue.

Structure du domaine RBD (receptor-binding domain, en bleu) et du domaine RBM (receptor binding motif, en vert) de la protéine spike du SARS-CoV-2. Le RBM, qui est au contact direct avec le récepteur cellulaire humain ACE2, est en rouge. Mohd Gazzali A, et al. Molecules. 2020 Sep 1;25(17):3980.

Nouveau variant N.10

Un nouveau variant, désigné temporairement N.10, a été rapporté le 7 avril 2021 par des chercheurs de l’Institut Oswaldo Cruz (Fiocruz) sur le site virological.org. Ce virus renferme quatorze mutations qui font de lui, théoriquement, un nouveau VOI.

Le variant N.10 contient notamment les mutations V445A et E484K dans le RBD, le domaine de fixation de la protéine spike du SARS-CoV-2 sur le récepteur cellulaire ACE2. La mutation V445A se situe, elle, dans une boucle située dans le motif RBM (receptor binding motif). Celui-ci, qui se trouve dans le RBD, est la région qui est directement en contact avec le récepteur ACE2.

Le RBM est la cible de nombreux anticorps neutralisants. Toute mutation de cette région cruciale est donc susceptible de conférer une résistance partielle du virus vis-à-vis des anticorps produits en réaction à l’infection virale.

Dans ce variant N.10, les délétions (pertes de matériel génétique) sont, elles,  situées dans le NTD (domaine amino-terminal de la protéine spike), au sein ou à proximité immédiate d’un site également reconnu par les anticorps neutralisants. Ces délétions pourraient donc conférer une résistance à la neutralisation par des anticorps normalement dirigés contre le domaine NTD. Selon les chercheurs brésiliens, N.10, qui circule actuellement dans les états du nord-est du Brésil, pourrait avoir la capacité d’échapper à la fois aux anticorps anti-RBD et anti-NTD. Ils estiment donc que ce nouveau variant devrait faire l’objet d’une étroite surveillance épidémiologique.

Ce variant d’intérêt N.10 a probablement émergé fin décembre 2020, estiment Paola Cristina Resende et ses collègues du réseau de surveillance génomique Covid-19 Fiocruz qui ont séquencé des échantillons biologiques provenant du Maranhão, état du nord-est du Brésil. Ce nouveau VOI représentait 23 % des infections par le SARS-CoV-2 dans cet état entre janvier et février 2021.

Représentation artistique du coronavirus SARS-CoV-2 © Fusion Medical Animation on Unsplash

Nombreux variants circulants au Brésil

Outre les variants brésiliens P.1, P.2, N.9 et N.10, le B.1.351, plus connu sous le nom de variant sud-africain, circule aussi dans tout le Brésil.

Publiée le 8 avril sur le site virological.org, une étude apporte des informations sur la fréquence des variants SARS-CoV-2 dans la région métropolitaine de Belo Horizonte, capitale de l’état de Minas Gerais, un des états les plus peuplés du Brésil avec plus de 21 millions d’habitants.

Cette enquête d’épidémiologie moléculaire a consisté dans le séquençage génomique de souches virales isolées dans 75 échantillons cliniques recueillis entre le 28 octobre 2020 et le 15 mars 2021. Pour la première fois, le variant anglais B.1.1.7 a été détecté par séquençage direct et non plus indirectement sur la négativation de la détection du gène S (S gene target failure) au test PCR. Ce résultat montre donc que le variant anglais B.1.1.7 circule aussi au Brésil.

Dans l’état de Minas Gerais, le variant anglais représente 3,5 % des souches analysées, tandis que les fréquences des variants P.1 et P.2 se situent respectivement à 35 % et 48 %. Cette co-circulation de variants dotés d’une transmissibilité accrue et d’un échappement immunitaire est contemporaine d’une récente augmentation des cas d’infections et des décès dans la région métropolitaine de Belo Horizonte.

Malgré le faible nombre d’échantillons analysés, cette étude a également montré un changement dans la composition génétique des virus SARS-CoV-2 dans la région métropolitaine de Belo Horizonte.

Alors que le variant P.2 avait été la lignée principale pendant la majeure partie de la période observée, la fréquence du variant P.1 a rapidement augmenté au cours de l’étude jusqu’à devenir la lignée dominante au cours des semaines suivantes. Au total, les trois variants P.1, P.2 et B.1.1.7 ont pris le dessus sur les lignées virales (B.1.1.28 et B.1.1.33) qui circulaient depuis le début de la pandémie dans ce vaste état du sud-est du Brésil. Ce profil de remplacement correspond à celui observé dans d’autres régions du pays, confirmant l’avantage des variants préoccupants (VOC) sur les autres lignées virales.

Cette étude, publiée le 8 avril 2021 sur le site medRxiv et coordonnée par des chercheurs des universités fédérales de Rio de Janeiro et Belo Horizonte, révèle également la circulation d’un possible nouveau variant dérivé du lignage historique B.1.1.28. Le séquençage a montré que celui-ci renferme une combinaison unique de dix-huit mutations (dont quatre dans la protéine spike). Ce variant renferme notamment de nouvelles mutations aux positions 484 (E484Q) et 501 (N501T) associées à un échappement immunitaire et une plus grande transmissibilité du virus.

Le SARS-CoV-2 continue à évoluer

Cette même équipe a rapporté que certains variants SARS-CoV-2 préoccupants et d’intérêt identifiés au Brésil ont récemment évolué de façon à présenter un jeu de pertes et de gains de matériel génétique (des insertions-délétions dénommées indels) dans le domaine NTD de la protéine spike.

Ces résultats montrent donc que le SARS-CoV-2 n’en finit pas de s’adapter et d’évoluer pour échapper aux anticorps dirigés contre la région NTD et peut-être un jour devenir encore plus résistant que les variants brésiliens actuels P.1 et P.2.

La survenue au Brésil de mutations du SARS-CoV-2 à des positions identiques à celles déjà observées ailleurs dans le monde montre qu’il existe une évolution convergente tendant à rendre le virus plus contagieux (via l’émergence de mutations dans le RBD de la protéine S). Une hypothèse est que cette évolution du génome viral se produit sous l’effet d’une intense pression de sélection au sein d’une population de plus en plus largement immunisée par l’infection naturelle.

Les chercheurs brésiliens font remarquer que leurs échantillons biologiques ont été collectés auprès d’individus non apparentés dans différentes régions de l’état de Minas Gerais, ce qui tend à montrer que ce nouveau variant d’intérêt y circule largement. Seules deux séquences de ce nouveau virus sont aujourd’hui rapportées, alors qu’il faut au moins cinq séquences porteuses d’une même signature génétique pour officiellement parler de nouveau variant. Des études sont actuellement en cours dans cette même région sur un plus grand nombre de prélèvements biologiques.

Selon Filipe Romero Rebello Moreira et ses collègues, la présence dans ce variant d’une constellation de nouvelles mutations de même que les données de l’analyse phylogénétique montrent que ce virus correspond sans doute à un nouveau VOI qui devrait être désigné P.4.

E484K, mutation d’échappement immunitaire

Ces différents variants brésiliens ont la particularité de partager la mutation E484K sur la protéine spike. Une étude américaine, publiée le 7 avril 2021 dans la revue The Lancet Microbe, confirme que E484K s’accompagne d’une diminution du pouvoir neutralisant des anticorps.

Sonia Jangra et ses collègues de l’Icahn School of Medicine du Mont Sinaï de New York rapportent une moindre efficacité des anticorps neutralisants vis-à-vis d’un virus SARS-CoV-2 dans lequel la mutation E484K a été artificiellement introduite par rapport à la souche historique USA-WA1/2020 (isolée aux États-Unis chez un individu de retour de Wuhan).

L’impact de la présence de la mutation E484K a également été observé tant chez des individus vaccinés que chez des patients Covid-19 convalescents. Lorsque la quantité des anticorps IgG développés par un individu est peu importante (titre faible), celle-ci est diminuée d’un facteur 2,4 lorsque le virus est porteur de la mutation E484K. Lorsque le titre en anticorps IgG est modéré, on observe une diminution d’un facteur 4,2. En cas de titre en IgG élevé, celui-ci est tout de même réduit d’un facteur 2,6.

Ces données montrent donc que la seule présence de la mutation E484K (dans le domaine de liaison RDB de la protéine S au récepteur cellulaire ACE2) s’accompagne d’une diminution de la capacité des anticorps neutralisants à se fixer sur leur cible, que ceux-ci aient été produits après une infection naturelle ou induits par la vaccination.

Un titre en anticorps neutralisants faible ou modéré pourrait se traduire par une perte du pouvoir neutralisant. Il apparaît néanmoins que les patients ayant développé des titres en anticorps élevés vis-à-vis de la souche historique USA-WA1/2020 sont encore capables de neutraliser un virus SARS-CoV-2 recombinant porteur de la mutation E484K. D’où l’importance que la vaccination induise un taux d’anticorps neutralisants le plus élevé possible pour assurer une protection maximale vis-à-vis de telles souches.

Du fait du manque d’approvisionnement en vaccins, certaines autorités sanitaires ont décidé de différer la seconde injection vaccinale afin de délivrer la première dose au plus grand nombre de personnes. Selon les chercheurs new-yorkais, cette approche pourrait entraîner un moindre titre en anticorps, alors que leurs résultats montrent qu’un titre insuffisamment élevé est susceptible de se révéler problématique dans un contexte d’émergence de nouveaux variants.

Cela dit, on ignore dans quelle mesure d’autres mécanismes immunologiques pourraient tout de même conférer une protection, en l’occurrence la production d’autres types d’anticorps dit non-neutralisants et plus encore la participation de lymphocytes T impliqués dans l’immunité cellulaire.

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